Transformação de planta modelo (Arabidopsis thaliana) com transgene que confere resistência a seca

Abstract

A escassez de água é fator limitante na produção de diversas culturas agrícolas resultando em enormes quedas na produção e tendo profundas implicações socioeconômicas. Por outro lado, a super expressão de BiP (proteína de ligação) em tabaco conferiu alta tolerância quando submetida a estresse hídrico, demonstrando o potencial deste gene para o desenvolvimento de plantas transgênicas tolerantes à seca em culturas importantes para o agronegócio e agricultura familiar. No entanto, os mecanismos moleculares pelos quais BIP confere tolerância não são conhecidos. Por outro lado, o uso da transgenia tem levantado uma série de questões a respeito de possíveis efeitos pleiotrópicos que podem resultar da expressão de transgenes. Para entender os mecanismos moleculares envolvidos na super-expressão do gene BIP e detectar possíveis efeitos pleiotrópicos advindos da expressão de BIP, plantas modelo (Arabidopsis thaliana) foram transformadas com o este gene através do método de infiltração por botão floral mediado por Agrobacterium tumefaciens. As plantas submetidas ao tratamento de transformação foram autopolinizadas em casa de vegetação e as sementes resultantes foram coletadas, esterilizadas e semeadas em placas de petri contendo meio MS acrescido de antibiótico (fator de seleção). Os possíveis transformantes foram transferidos para meio de enraizamento e aclimatados. O gene ntpII (resistência ao antibiótico) foi detectado através de reação de PCR utilizando DNA genômico das plantas confirmando que vários eventos transgênicos foram obtidos. Os transformantes agora estão sendo submetidos a estresse hídrico e RNA destas plantas e de plantas sem tratamento serão utilizados como sonda em experimentos de “microarrays” em chips comercias contendo todos os 27.000 genes de Arabidopsis thaliana.